產(chǎn)品名稱(chēng)：Beyotime碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號(hào)：c0533

產(chǎn)品品牌：碧云天

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)是碧云天最新研發(fā)的一種以納米材料為基礎(chǔ)的zui便捷的高效細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，達(dá)到甚至超過(guò)了國(guó)際主流轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效果，并且轉(zhuǎn)染過(guò)程無(wú)須任何孵育時(shí)間，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞轉(zhuǎn)染的至簡(jiǎn)操作。適用于把質(zhì)粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白復(fù)合物或帶負(fù)電荷的蛋白轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞中，也可以用于活體動(dòng)物的核酸轉(zhuǎn)染以及用于基因治療。

常見(jiàn)問(wèn)題：

1. 轉(zhuǎn)染效率低：

a. 優(yōu)化質(zhì)粒與Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑比例，對(duì)于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，可適當(dāng)增加Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的用量。

b. 應(yīng)使用高純度、無(wú)菌、無(wú)污染物的質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染，DNA純度方面A260/A280比值要接近1.8，通常宜控制在1.8-1.9范圍內(nèi)，偏低則有可能有蛋白污染，偏高則有可能有RNA污染。可以使用碧云天生產(chǎn)的質(zhì)粒大量抽提試劑盒(D0026)進(jìn)行抽提，以保證可以獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。

c. 貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)狀態(tài)良好，細(xì)胞密度達(dá)70-80%時(shí)才可進(jìn)行轉(zhuǎn)染，過(guò)稀或過(guò)密都可能影響轉(zhuǎn)染效率，不同細(xì)胞的最佳轉(zhuǎn)染密度需要自行摸索。懸浮細(xì)胞宜在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

d. 需使用無(wú)抗生素和無(wú)血清培養(yǎng)液配制Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒或siRNA等的混合物。

e. 轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)時(shí)間不足，而被誤以為轉(zhuǎn)染效率偏低。不同細(xì)胞轉(zhuǎn)染后至顯著表達(dá)所需要培養(yǎng)的時(shí)間通常為24-48小時(shí)。

f. 檢查細(xì)胞是否有支原體感染，支原體感染會(huì)影響細(xì)胞增殖，并很可能影響轉(zhuǎn)染效率。

g. 使用傳代次數(shù)相對(duì)較少的細(xì)胞，細(xì)胞傳代次數(shù)太多，對(duì)轉(zhuǎn)染效率會(huì)有一定的影響。

h. 如果沒(méi)有檢測(cè)到目的蛋白表達(dá)，應(yīng)該仔細(xì)核對(duì)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的測(cè)序結(jié)果，確保測(cè)序結(jié)果和讀碼框wan全正確。啟動(dòng)子、復(fù)制起始位點(diǎn)、質(zhì)粒大小都會(huì)影響基因表達(dá)水平。

i. 如果靶基因的敲減(knockdown)效果欠佳，應(yīng)該考慮嘗試設(shè)計(jì)不同的siRNA。

2. 出現(xiàn)一定程度的細(xì)胞毒性：

a. 轉(zhuǎn)染前，細(xì)胞至少鋪板 18-24 小時(shí)。

b. 質(zhì)粒用量不變，Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的用量減少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 質(zhì)粒，4μl Lipo8000™，如果發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞毒性，六孔板每孔可以嘗試使用 2.5μg 質(zhì)粒，3μl Lipo8000™，此時(shí)經(jīng)測(cè)試對(duì)于轉(zhuǎn)染效率沒(méi)有很明顯的影響。

c. 減少質(zhì)粒用量，按照比例減少 Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑；或在前者的基礎(chǔ)上 Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑用量再減少 25%。

d. 檢查是否轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度太低，Lipo8000™轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度以 70-80%為佳。

e. 某些細(xì)胞對(duì) Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑比較敏感，可以在轉(zhuǎn)染后 4-6 小時(shí)更換細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)染效率無(wú)顯著影響。

f. 檢查細(xì)胞是否有支原體等微生物污染。

產(chǎn)品選購(gòu)：

北京百奧創(chuàng)新科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)Beyotime碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)，歡迎選購(gòu)！